本书作为普通高等教育“十一五”国家级规划教材。全书分为分子生物学实验及生物化学实验两部分，共设计了24个综合性较强的实验，其中14个分子生物学实验以应用广泛的绿色荧光蛋白基因为主线贯穿，涵盖了分子生物学的基本实验技术；10个生物化学实验涉及常用的电泳技术、亲和色谱技术和免疫学实验技术。

本书分为分子生物学实验及生物化学实验两部分，共设计了24个综合性较强的实验，其中14个分子生物学实验以应用广泛的绿色荧光蛋白基因为主线贯穿，涵盖了分子生物学的基本实验技术，包括原核生物细胞转化，质粒DNA的分离纯化，限制性内切酶对质粒DNA的酶切与琼脂糖凝胶电泳鉴定，重组技术，PCR基因扩增，基因突变技术，蛋白质电泳分离表达蛋白，蛋白质转移技术，蛋白质分离纯化技术等。10个生物化学实验涉及常用的电泳技术、亲和色谱技术和免疫学实验技术。

本书作为普通高等教育“十一五”国家级规划教材，是北京大学多年实验教学改革的成果，充分体现了实验内容的综合性，通过学习和训练，学生们在创新性思维和科研动手能力上都会得到很大提高，适合高等院校生命科学类专业本科生和研究生使用。

第一部分 分子生物学实验

背景资料

实验1 绿色荧光蛋白(GFP)基因转入原核细胞

实验2 目的基因载体的分离纯化与质量测定

实验3 含绿色荧光蛋白基因载体的酶切与电泳鉴定

实验4 增强型绿色荧光蛋白基因表达载体的构建

实验5 绿色荧光蛋白基因的表达与鉴定

实验6 PCR体外扩增绿色荧光蛋白基因及其克隆与表达

实验7 红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白基因的克隆和在大肠杆菌中的表达

实验8 谷胱甘肽转硫酶一绿色荧光蛋白融合蛋白的基因克隆及其表达

实验9 增强型绿色荧光蛋白的定点突变及表达检测

实验10 携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的温度敏感型表达载体的构建、鉴定和表达量的测定

 附录10-1：pBV220全序列(从EcoR I酶切位点第一个A开始)

 附录10-2：EGFP基因全序列

实验11 双报告基因系统的构建及初步检测

 附录11-1：Luciferase基因全序列

 附录11-2：萤光素酶检测步骤

实验12 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因构建重组酵母检测环境中雌二醇的含量

实验13 绿色荧光蛋白的分离、纯化及其鉴定

实验14 谷胱甘肽转硫酶与绿色荧光蛋白融合蛋白的分离、纯化和酶学的测定

附录Ⅰ

第二部分 生物化学实验

电泳技术

实验15 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验16 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳

实验17 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳

亲和色谱技术

实验18 鸡卵黏蛋白的分离纯化

实验19 胰蛋白酶粗提取与活性测定

实验20 亲和色谱分离胰蛋白酶

实验21 胰蛋白酶动力学测定

免疫学技术

实验22 抗血清的制备

实验23 抗血清抗体的测定

实验24 酶联免疫吸附测定

附录Ⅱ