作者吴敬、顾正彪、陈坚等多年来一直从事CGT酶的研究工作，指导了多名博士、硕士研究生从事CGT酶产物特异性改造、热稳定性改造、重组表达CGT酶以及发酵优化，此外开展了利用CGT酶制备α-、β-、γ-环糊精，合成偶合糖以及改性甜菊糖等方面的应用研究。作者现将这些研究成果加以整理，并结合国内外最新资料，汇集成《环糊精葡萄糖基转移酶的制备与应用》一书。该学术专著的撰写能反映CGT酶研究最新成果，旨在满足从事CGT酶研究和环糊精制备开发应用的广大学者和科技工作者的需求，对从事其他酶制剂的制备和应用的科研人员也有一定的参考价值。

环糊精葡萄糖基转移酶(CGT酶)是一种多功能酶，可将淀粉转化为环糊精，环糊精及其衍生物作为高附加值产品有着广泛应用。吴敬、顾正彪、陈坚等编著的《环糊精葡萄糖基转移酶的制备与应用》是反映CGT酶研究最新成果的学术专著，是作者将长期从事酶工程科研、教学和应用的研究成果加以整理，并结合国内外最新资料汇集而成。主要介绍CGT酶及其催化机理，CGT酶的产物特异性改造、热稳定性改造、重组表达、发酵优化，利用CGT酶制备各种类型环糊精，以及基于CGT酶的其他产品制备技术，包括2-氧-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸、甜菊糖苷和偶合糖的制备。

《环糊精葡萄糖基转移酶的制备与应用》可作为生物工程、食品科学与工程等专业的教学参考书，也可供相关专业技术人员参考。

第一章 绪论

 第一节 CGT酶概述3

 第二节 CGT酶的三维结构5

 第三节 CGT酶的催化机理7

一、CGT酶与底物结合的分子机制7

二、CGT酶的转糖基反应机理9

三、CGT酶的环化机理12

第二章 环糊精葡萄糖基转移酶的产物特异性改造

 第一节 CGT酶产物特异性的研究进展17

 第二节 P-maceransα-CGT酶的克隆表达及性质研究23

一、P-maceransα-CGT酶在大肠杆菌中的克隆表达24

二、重组P-maceransα-CGT酶的分离纯化26

三、重组α-CGT酶的性质30

 第三节 定点突变提高CGT酶的α-环糊精特异性38

一、野生和突变CGT酶的表达与纯化39

二、定点突变影响CGT酶的环糊精形成活力40

三、定点突变影响环糊精的生产43

 第四节 定点突变提高CGT酶的β-环糊精特异性48

一、多重序列比对48

二、野生和突变CGT酶的表达与纯化50

三、Lys47对产物特异性的影响51

第三章 环糊精葡萄糖基转移酶的热稳定性改造

 第一节 CGT酶高温解折叠研究61

一、研究方法介绍62

二、CGT酶的分子动力学模拟65

 第二节 盐桥与CGT酶耐热性的关系研究83

一、研究方法介绍84

二、CGT酶热不稳定区分析87

第四章 环糊精葡萄糖基转移酶的发酵生产

 第一节 CGT酶的发酵109

一、种子的培养与保存109

二、摇瓶水平的工艺优化113

三、发酵罐水平的工艺优化131

 第二节 CGT酶制剂稳定性153

第五章 环糊精的制备技术

 第一节 环糊精含量的分析161

一、色谱法161

二、毛细管电泳163

三、分光光度法163

四、其他方法174

 第二节 环糊精的制备工艺174

一、非控制过程174

二、控制过程176

 第三节 影响环糊精得率的因素180

一、底物180

二、反应条件184

第六章 基于环糊精葡萄糖基转移酶的其他产品制备技术

 第一节 2-氧-α-D-吡喃葡萄糖基抗坏血酸的制备195

一、AA-2G的合成方法196

二、AA-2G转化合成中关键因素的确定198

三、AA-2G转化条件优化200

 第二节 甜菊糖苷的制备210

一、CGT酶的筛选211

二、反应条件对转葡萄糖基反应的影响213

三、改性后产物的甜味评价221

 第三节 偶合糖的制备226

一、利用CGT酶生产偶合糖工艺227

二、偶合糖的精制228

三、偶合糖的结晶229

参考文献232