美国冷泉港实验室被称为世界生命科学的圣地与分子生物学的摇篮，为全球影响最大的十大研究机构之一。《酵母遗传学方法实验指南》就是冷泉港实验室组织该领域知名学者合编的一本培训教程，迄今已有47年的历史，其间已更新再版多次，以及时适应这个领域的最新进展。本教程最大的特点在于其权威性、全面性和可操作性，它将酵母经典遗传学和分子生物学实验的基本原理与操作方法都做了详尽的介绍。因此，无论对于专业科研人员还是初学者，都是一本不可多得的必备参考书。

本书作为冷泉港实验室出版社的经典酵母实验教程的第二版，收录了酵母研究中最常用的减数分裂作图、转化、基因置换等11个实验，以及酵母蛋白抽提、活体染色、RNA分离等28种技术方法。文字简洁明了，内容全面而详细，兼顾经典和前沿，是该领域的权威之作。

适合于大学院校、科研单位的教师、学生及研究人员作为实验指导书，亦可供从事酵母相关生物制品行业的科技人员参考。

译者序

原著序

前言

遗传学命名法

实验篇

 实验一 酵母细胞的观察

 实验二 营养缺陷型、温度敏感型和渗透压敏感型突变株的分离和鉴别

 实验三 减数分裂作图

 实验四 有丝分裂重组和随机孢子分析

 实验五 酵母转化

 实验六 合成致死突变体

 实验七 基因置换

 实验八 ras2抑制基因的分离

 实验九 细胞型操作

 实验十 用插入诱变法分离突变体

 实验十一 利用双杂交差异互作筛选以分离功能突变体

技术和方案篇

 技术和方案1 酵母的高效转化

 技术和方案2 快速粗放的酵母菌落质粒转化法

 技术和方案3 酵母DNA分离

 技术和方案4 酵母蛋白质的抽提

 技术和方案5 TAP纯化方法

 技术和方案6 酵母RNA的分离

 技术和方案7 质粒DNA的羟胺突变

 技术和方案8 酵母β-半乳糖苷酶的测定

 技术和方案9 羧肽酶Y的平板鉴定

 技术和方案10 随机孢子分析

 技术和方案11 酵母活细胞染色

 技术和方案12 酵母免疫荧光法

 技术和方案13 已固定细胞的肌动蛋白染色

 技术和方案14 PCR介导基因破坏法

 技术和方案15 酵母菌落PCR

 技术和方案16 分光光度法测酵母细胞密度

 技术和方案17 细胞同步化

 技术和方案18 染色质免疫沉淀

 技术和方案19 酵母DNA流式细胞记数

 技术和方案20 对数生长

 技术和方案21 EMS诱变

 技术和方案22 四分体解剖

 技术和方案23 制备四分体解剖针

 技术和方案24 挑取合子

 技术和方案25 测定铺板效率

 技术和方案26 小量提取E.coli DNA

 技术和方案27 E.coli感受态的制备与转化

 技术和方案28 系统缺失菌株的保存及操作

附录A 培养基

附录B 菌株保存

附录C 酵母遗传图谱和物理图谱

附录D 平板划线模板

附录E 菌株核型分析电泳的Southern印迹作图

附录F 菌株

附录G 用标准血球计数板进行酵母细胞计数

附录H 四分孢子计分表